שרשרת פולימראז התגובה ואת האופי וההיקף של

תגובת שרשרת של פולימראז (PCR) - שיטה של ביולוגיה מולקולרית, המאפשרת לזהות כמויות קטנות חומר ביולוגי של חומצה דאוקסיריבונוקלאית (DNA), או ליתר דיוק, כמה שברי שלה, ולהתרבות אותם פעמים רבות. אחר כך הם זוהו באופן ויזואלי על ידי ג'ל אלקטרופורזה. התגובה פותחה בשנת 1983 על ידי ק 'מוליס ו נכללה ברשימת תגליות המצטיינות של השנים האחרונות.

מה הם המנגנונים PCR

ההליך כולו מתבסס על היכולת של חומצות גרעין עצמית לשכפל, כי במקרה זה החזיק באופן מלאכותי במעבדה. שכפול ה- DNA לא יכול להתחיל בכל אזור של המולקולה, אך רק באזורים עם רצף מסוים של נוקלאוטידים - שברי החל. במטרה להביא את תגובת השרשרת של פולימראז החל, ואנחנו צריכים (חיישנים או DNA) פריימר. אלה הם שברים קצרים של רצפי DNA עם רצף נוקליאוטידים נתון. הם משלימים (למשל, מתאימים) תחילת חלקי דגימת DNA.

כמובן, כדי ליצור פריימרים, מדענים חייבים ללמוד את רצף הנוקליאוטידים של חומצות הגרעין, אשר מעורב בהליך. בדיקות דנ"א אלה להבטיח את הספציפיות של התגובה והייזום שלה. תגובת השרשרת של פולימראז לא תלך, אם המדגם אינו מוצא לפחות מולקולה אחת של DNA הרצוי. באופן כללי, התגובה מחייבת צבעי יסוד הנ"ל, סט של נוקלאוטידים, DNA פולימרז עמיד בחום. זה האחרון הוא אנזים - תגובות קטליטי של סינתזה של מולקולות חומצות גרעין חדשות על בסיס מדגם. כל החומרים הללו, כוללים חומר ביולוגי, אשר יש צורך לזהות DNA משולבים לתוך תערובת תגובה (פתרון). הוא ממוקם ב תרמוסטט מיוחד שמבצע חימום שלה מאוד מהיר וקירור בתוך הזמן המוגדר - מחזור. הם בדרך כלל 30-50.

איך הוא תגובה זו

המהות של זה היא כי במהלך מחזור אחד, פריימרים מצורפים חלקים של ה- DNA הרצוי, ולאחר מכן הוא הולך להכפיל ידי האנזים. על הבסיס של גדילי דנ"א וכתוצאה מסונתזים במחזורים הבאים יותר ויותר חתיכות של מולקולות זהות.

תגובת השרשרת של פולימראז הוא התאושש באופן עקבי ביצוע השלבים שלה. זה מאופיין ראשון להכפיל את כמות המוצר במהלך כל מחזור של חימום וקירור. בשלב השני של התגובה מתרחשת האטה מאז האנזים פגום ומאבד פעילות. בנוסף, מתרוקנים מניות של נוקלאוטידים ו פריימרים. בשלב האחרון - הרמה - המוצרים אינם צוברים ריאגנטים מעל.

איפה הוא משמש

אין ספק, תגובת השרשרת של פולימראז היישום הרחבה מוצאת ברפואה ובמדע. הוא משמש בביולוגיה ציבורית ופרטית, וטרינריה, רוקחות, ואפילו אקולוגיה. בעוד שהאחרון עושה כדי לפקח על איכות מזון וחפץ סביבתיים. בשימוש פעיל תגובת השרשרת של פולימראז בפועל המשפטיים לאשר אבהות והזדהות של זהותו של אדם. בשנת מדע הזיהוי הפלילי, כמו גם פליאונטולוגיה, לעיתים בשיטה זו היא הדרך היחידה, כי זה בדרך כלל זמין לחקר כמויות קטנות מאוד של DNA. כמובן, שיטה מאוד בשימוש נרחב מצויה הפרקטיקה של רפואה. הוא היה זקוק לה בתחומים כמו גנטיקה, זיהומיות ומחלות אונקולוגיות.