בדיקות סרולוגיות: סוגים, שימוש

אבחון מעבדתי של כמעט כל מחלות זיהומיות מבוססת על זיהוי של הדם נוגדנים של המטופל, אשר מיוצרים על ידי אנטיגן הפתוגן, שיטות סרולוגיות. הם נכנסו פרקטיקה רפואית בשלהיי המאה התשע-עשרה והתחילה - המאה עשרים.

התפתחות המדע סייעה להגדיר את מבנה אנטיגני של חיידקים ו נוסחאות כימיות של הרעלים שלהם. אפשר ליצור לא רק סרום טיפולי אלא גם אבחון. הם מתקבלים על ידי מתן חיות מעבדת פתוגנים מוחלש. לאחר כמה ימים של השריית ארנבות דם או עכברים הכינו מוצרים המשמשים לזיהוי חיידקים או רעלנים שלהם באמצעות בדיקות סרולוגיות.

הביטוי החיצוני של התגובה הזו תלוי בתנאים של הניסוח שלה והמצב אנטיגנים בדמה של המטופל. אם חיידקים הם חלקיקים מסיסים, הם להתיישב, lysed, משותק או בכריכה בסרום. אם אנטיגנים הם מסיסים, נראה כי התופעה של נטרול או משקעים.

התלכדות (PA)

מבחן התלכדות סרולוגית הוא מאוד ספציפי. קל לבצע, והוא די ברור לזהות נוכחות של אנטיגנים במהירות בסרום החולה. הוא משמש לקביעת התגובה וידאל (אבחון בטיפוס paratyphoid) ו Weigl (טיפוס).

היא מבוססת על אינטראקציה ספציפית בין נוגדנים אנושיים (או agglutinins) ותאים מיקרוביאליים (agglyutenogenami). בעקבות האינטראקציה שלהם נוצרים חלקיקים כי משקע. זהו סימן חיובי. לקביעת תגובה עשוי לשמש סוכני מיקרוביאלי חיים או מתים, פטריות, פרוטוזואה, תאי דם ואת תאים סומטיים.

תגובה כימית מחולקת לשני שלבים:

1. מתחם נוגדנים ספציפיים (AT) עם אנטיגנים (Ag).
2. שאינו ספציפי - בתצהיר של קונגלומרטים AG-AT, כלומר היווצרות של לְהִצְטָמֵד.

התלכדות תגובה עקיפה (TPHA)

תגובה זו היא רגישה יותר מזו הקודמת. הוא משמש לאבחון של מחלות הנגרמות על ידי חיידקים, טפילים תאיים, פרוטוזואה. זה כל כך ספציפי שיכול לזהות אפילו בריכוזים נמוכים מאוד של נוגדנים.

לניסוח שלה באמצעות תאי הדם האדומים של כבשים מטוהרים ותאי דם אדומים של אדם שטופלו נוגדנים או אנטיגנים (זה תלוי מה שהמעבדה רוצה למצוא). בחלק מהמקרים, תאי דם אדומים אנושיים שטופלו אימונוגלובולינים. סרולוגית תגובה של אריתרוציטים נחשבה תקפה אם ממנו המשקעים התרחשו בתחתית הצינור. התגובה החיובית נוכל לומר כאשר התאים מסודרים בצורת מטרייה הפוכה, כובשת את כל התחתית. התגובה השלילית מובקע כאשר תאי הדם האדומים להתיישב בצורה של טור או כפתורים במרכז התחתון.

תגובה משקעת (RP)

תגובות סרולוגית מסוג זה משמשים לזיהוי אנטיגנים חלקיקים קטנים מאוד. זה עשוי להיות, למשל, חלבונים (או חלקים ממנו), תרכובות של חלבונים עם שומנים או פחמימות, חלק החיידקים ורעלנים שלהם.

סרתי על התגובה מתקבל על ידי נגיעות מלאכותיות של בעלי חיים, בדרך כלל ארנבות. בשיטה זו, ניתן לקבל באופן מוחלט כל בסרום מזרז. Staging מנגנון הפעולה דומה משקעים סרולוגית על התלכדות. הנוגדנים הכלולים לאגד הסרום נגד אנטיגנים של הפתרון קולואידים ליצירת מולקולות חלבון גדולות, אשר מופקדות על החלק התחתון של הצינור או על המצע (ג'ל). שיטה זו נחשבת מאוד ספציפיים יכולה לזהות אפילו כמויות זעירות של החומר.

משמש לאבחון מגיפה, טולרמיה, אנתרקס, דלקת קרום המוח ומחלות אחרות. כמו כן מעורב הבדיקה המשפטית.

מבחן משקעים ג'ל

בדיקות סרולוגיות יכול להתבצע לא רק במדיום נוזלי, אבל הג'ל agarose. זה נקרא שיטת משקעים מפוזרת. עם זאת, לחקור את הרכבם של תערובות אנטיגני מורכבות. שיטה זו מבוססת על chemotaxis של אנטיגנים ונוגדנים, ולהיפך. הג'ל הם עוברים אחד כלפי שניים במהירויות שונות פגישה כדי ליצור קווי משקעים. כל שורה - סט אחד של K-AT.

נטרול אַנְטִיטוֹקסִין exotoxin (RN)

סרום נוֹגֵד רַעַל יכול לנטרל exotoxin אשר מיקרואורגניזמים לייצר. על סמך נתונים אלו בדיקות סרולוגיות. למיקרוביולוגיה משתמשת בשיטה זו עבור טיטרציה של סרה, רעלי toxoids, כמו גם הפעילות הטיפולית שלהם. כוחו של ניטרול רעלן נקבע על ידי היחידות הקונבנציונליות - AE.

יתר על כן, בשל התגובה הזו יכולה לקבוע את המינים או סוגים השייכים exotoxin. הוא משמש לאבחון של טטנוס, דיפטריה, בוטוליזם. המחקר יכול להתבצע "על הזכוכית", ואת בתוך הג'ל.

תגובה ימס (RL)

הסרום החיסוני, אשר נכנס לגוף של המטופל, יש, מלבד תפקידו העיקרי של חסינות פסיבית, אפילו ומאפייני ממס. היא מסוגלת המסת סוכנים חיידקים, וירוסים אלמנטים הסלולר זרים הנכנסים לגוף של המטופל. בהתאם הספציפי של הנוגדנים הכלולים בסרום מבודד bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, המוליזין ואחר.

נוגדנים ספציפיים אלה נקראים "שלמים". הוא מצוי בנוזלי כמעט כל הגוף, יש לו מבנה חלבון מורכב מאוד רגיש עלייה בטמפרטורה, מזועזע, חומצות ושמש ישירה. אבל במצב המיובש הוא מסוגל לשמור על המאפיינים הממסים שלהם של עד שישה חודשים.

ישנם כמה סוגים של בדיקות סרולוגיות מסוג זה:

- bacteriolysis;

- המוליזה.

Bacteriolysis מתבצעת באמצעות נסיוב הדם של המטופל ואת הסרום חיסוני ספציפי עם חיידקים חיים. אם, אז החוקר רואה את תמס של החיידקים, ואת התגובה תיחשב מספר מספיק של השלמה חיובית קיים בדם.

התגובה סרולוגיות בדם השנייה היא כי ההשעיה של אריתרוציטים מטופלים המכילים סרום חולה המוליזין, אשר מופעלים רק בנוכחות מחמאה בפרט. אם יש אחד, אז במעבדה צופה פירוק של כדוריות דם אדומות. תגובה זו נמצאת בשימוש נרחב ברפואה מודרנית כדי לקבוע את כייל של השלמה (כלומר, הסכום הקטן שלה מעורר תמס של כדוריות דם אדומות) בנסיוב הדם לייצור assay מחייב השלם. זה היה באופן זה שנערך תגובה סרולוגית לעגבת - וסרמן.

קיבוע משלים (RSK)

תגובה זו משמשת לגילוי נוגדנים בסרום מעניק לחולת סוכן זיהומיות כמו גם לזהות את המחולל של המבנה אנטיגני שלה.

עד לנקודה זו תארנו בדיקות סרולוגיות פשוטות. RAC נחשב תגובה קשה, שכן היא אינטראקציה לא שניים, אלא שלושה אלמנטים: נוגדן, אנטיגן ומשלימים. מהותו נעוצה בעובדה כי האינטראקציה בין נוגדן אנטיגן מתרחשת רק בנוכחות חלבונים להחמיא אשר שנספחו על פני השטח של K-AT המורכב נוצר.

עצמם אנטיגנים לאחר תוספת של השלמה, בכפוף לשינויים משמעותיים, אשר מציינים את איכות התגובה. זה עשוי להיות תמס, המוליזה, וקיבוע, בקטריות או השפעה bacteriostatic.

התגובה עצמה מתרחשת בשני שלבים:

1. ההיווצרות של אנטיגן נוגדן, אשר אינו חוקר חזותי מורגש.
2. שינוי אנטיגן תחת הפעולה של השלמה. שלב בדרך זו ניתן לייחס בעין בלתי מזוינת. אם התגובה החזותית אינה גלויה, ואז להשתמש במערכת חיווי הנוספת המאפשרת לזהות שינויים.

מערכת חיווי

תגובה זה מבוססת על כריכת השלמה. המבחנות שעה לאחר הגדרת RSK הוסיף אריתרוציטים כבשים מטוהרים המוליטית בסרום לא המכיל השלמה. אם הצינור נותר השלמה מאוגדת, זה יצטרף N-במתחם שנוצר בין תאי דם כבשי המוליזין, ולגרום פירוקן. משמעות הדבר כי DGC היא שלילית. אם תאי דם אדומים נותרו ללא פגע, ואז, בהתאם, התגובה היא חיובית.

hemagglutination (RHA)

ישנם שני hemagglutination שונה במהותו. אחד מהם - סרולוגיות, הוא משמש לקביעת קבוצות דם. במקרה זה אריתרוציטים אינטראקציה עם נוגדנים.

והתגובה השנייה אינה קשורה סרולוגיות, מאז כדוריות דם אדומות להגיב עם hemagglutinin מיוצר על ידי וירוסים. מאז כל שוחנות פועלת רק על אריתרוציטים ספציפיים (עוף, כבש, קוף), ניתן להניח התגובה הזו ספציפית צרה.

תשובה חיובית או שלילית מנקה, זה אפשרי עבור המיקום של תאי הדם בתחתית הצינור. אם הם להבין דומים מטרייה הפוכה, אז הווירוס הרצוי שוהה של דם החולה. ואם כל תאי הדם האדומים יצרו כמו עמודות מטבע, אין פתוגנים ידועים.

התגובה של עיכוב hemagglutination (חי)

תגובה ספציפית מאוד זו, המאפשרת להקים את הטופס, סוג של וירוס או נוכחות של נוגדנים ספציפיים בסרום של הדם של המטופל.

מהותו נעוצה בעובדה כי הנוגדנים מתווספים הצינור המכיל את החומר למבחן, מונעים בתצהיר של אנטיגנים על אריתרוציטים, ובכך לעצור hemagglutination. זוהי אינדיקציה איכותית של הנוכחות של אנטיגנים ספציפיים דם וירוס ספציפי רצוי.

immunofluorescence התגובה (הרי"ף)

התגובה מבוססת על היכולת לזהות קומפלקסים עם מיקרוסקופ פלואורסצנטי AT-AH לאחר צבעי flyuorohromnymi הטיפול. שיטה זו היא פשוטה לשימוש, אינו דורשת בידוד של התרבות טהורה לוקחת מעט זמן. זה חיוני לאבחון מהיר של מחלות זיהומיות.

בפועל, בדיקות סרולוגיות אלה נחלקות לשתי קטגוריות: ישירות ועקיפות.

RIF ישיר מיוצר אנטיגן אשר מעובד בסרום פלורסנט בעבר. ועקיפות הן כי תרופת מטופל ראשונה עם diagnosticum הקונבנציונלי הכולל נוגדנים לאנטיגן הרצוי ולאחר מכן מחדש מיושם מי גבינת פלורסנט, אשר היא ספציפי החלבונים של K-AT המורכב, והתאים מיקרוביאליים להיות גלויים על ידי מיקרוסקופ.